黃曲霉毒素B對人危害以及檢測方法介紹
黃曲霉毒素B1是二氫呋喃氧雜萘鄰酮的衍生物,含有一個雙呋喃環(huán)和一個氧雜萘鄰酮。黃曲霉毒素B1是已知的化學物質(zhì)中致癌性最強的一種。黃曲霉毒素B1對包括人和若干動物具有強烈的毒性,其毒性作用主要是對肝臟的損害。
黃曲霉毒素B1存在于土壤,動植物各種堅果,特別是花生和核桃中。在大豆、稻谷、玉米、通心粉、調(diào)味品、牛奶、奶制品、食用油等制品中也經(jīng)常發(fā)現(xiàn)黃曲霉毒素。一般以熱帶和亞熱帶等南方高溫、高濕地區(qū)受污染最為嚴重,食品中黃曲霉毒素的檢出率比較高。
黃曲霉毒素耐熱,280℃才可裂解,一般蒸煮加工的溫度下難以破壞。
黃曲霉毒素B1的代謝主要發(fā)生在肝臟,腎臟、脾臟和腎上腺也會有所分布,一般不會存在于肌肉中。
黃曲霉毒素B1對人體的危害:
(1)大量攝入時,可發(fā)生急性中毒,出現(xiàn)急性肝炎、出血性壞死、肝細胞脂肪變性和膽管增生。
(2)微量持續(xù)攝入,可造成慢性中毒,生長障礙,引起纖維性病變,致使纖維組織增生。
(3)具有致癌性,可導致人類肝癌和食道癌(黃曲霉毒素)。
檢測方法
薄層色譜法(TLC):
TLC法是測定黃曲霉毒素的經(jīng)典方法,是中國測定食品及飼料中AFT黃曲霉素B1(AFB1)的標準方法之一。其原理是針對不同的樣品,用適宜的提取溶劑將AFB1從樣品中提取出來,經(jīng)溶劑萃取純化,再在薄層板上層析展開,分離,利用AFB1的熒光特性,根據(jù)熒光斑點的大小和強弱,比較測定黃曲霉毒素含量。
TLC有單項展開法和雙向展開法,TLC法由于設(shè)備簡單,易于普及,所以國內(nèi)外仍在使用,但由于該法樣品前處理繁瑣,且提取和凈化效果不夠理想,提取液中雜質(zhì)較多因而在展開時影響斑點的熒光強度,而雙向展開雖避免了雜質(zhì)干擾,增加了靈敏度,但增加了操作步驟和時間。
液相色譜法:
高效液相色譜法對黃曲霉毒素B1、B2、G1、G2分別進行定量分析。其主要是用熒光檢測器檢測,在適宜的流動相條件下,采用反相C18柱,使多種黃曲霉毒素同時分離。
黃曲霉毒素免疫親和柱HPLC法采用單克隆抗體免疫技術(shù),可以特效地將黃曲霉毒素與其他真菌素分離出來,分離效率和回收率高。此方法已得到廣泛應用,該方法的檢測限可達0.02~5ppb。
酶聯(lián)免疫法(ELISA):
酶聯(lián)免疫法檢測AFB1的理論基礎(chǔ)是抗原抗體反應,其采用單克隆或多克隆抗體技術(shù),具有特異性強、分析時間短等優(yōu)點。其原理是抗原(或抗體)吸附于載體上的免疫吸附劑和用酶標抗體(或抗原)與標本中的待測物(抗原或抗體)起特異的免疫學反應,最后用測定酶活力的方法來增加測定的敏感度。大體分為2類:一是用雙抗體夾心法檢測樣本中的AFTB1, 二是用競爭法檢測樣本中的AFTB1。
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